Bộ DNA bộ gen của vi khuẩn TGuide

A-1 Nồng độ tế bào hoặc vi rút trong mẫu ban đầu thấp —Làm tăng nồng độ tế bào hoặc vi rút.

A-2 Ly giải mẫu không đủ — Các mẫu chưa được trộn kỹ với đệm ly giải. Nên trộn kỹ bằng cách xoáy xung 1-2 lần. — Ly giải tế bào không đủ gây ra bởi sự giảm hoạt động của proteinase K. — Ly giải tế bào không đủ hoặc sự phân huỷ protein do không đủ thời gian tắm nước ấm. Nên cắt khăn giấy thành từng miếng nhỏ và kéo dài thời gian tắm để loại bỏ hết cặn bẩn trong dịch lọc.

A-3 Hấp phụ DNA không đủ. —Không có etanol hoặc tỷ lệ phần trăm thấp thay vì 100% etanol được thêm vào trước khi chuyển dịch lysate sang cột spin.

A-4 Giá trị pH của dung dịch đệm rửa giải quá thấp. —Điều chỉnh độ pH trong khoảng 8,0-8,3.

Etanol dư trong dung dịch rửa giải.

—Có bộ đệm giặt PW còn sót lại trong dung dịch rửa giải. Có thể loại bỏ etanol bằng cách ly tâm cột quay trong 3-5 phút, sau đó đặt ở nhiệt độ phòng hoặc tủ ấm 50 ℃ trong 1-2 phút.

A-1 Mẫu không tươi. —Tách DNA mẫu dương tính làm đối chứng để xác định xem DNA trong mẫu có bị phân huỷ hay không.

A-2 Xử lý trước không đúng cách. —Có nguyên nhân do nghiền nitơ lỏng quá mức, lấy lại độ ẩm hoặc lượng mẫu quá lớn.

Các tiền xử lý phải khác nhau đối với các mẫu khác nhau. Đối với các mẫu thực vật, đảm bảo nghiền kỹ trong nitơ lỏng. Đối với mẫu động vật, đồng nhất hoặc nghiền kỹ trong nitơ lỏng. Đối với những mẫu có thành tế bào khó vỡ như vi khuẩn G + và nấm men, nên sử dụng lysozyme, lyticase hoặc các phương pháp cơ học để phá vỡ thành tế bào.

4992201/4992202 Bộ DNA bộ gen thực vật áp dụng phương pháp dựa trên cột yêu cầu cloroform để chiết xuất. Nó đặc biệt thích hợp cho các mẫu thực vật khác nhau, cũng như bột khô thực vật. Hi-DNAsecure Plant Kit cũng có dạng cột, nhưng không cần chiết xuất phenol / chloroform, làm cho nó an toàn và không độc hại. Nó thích hợp cho các loại cây có hàm lượng polysaccharid và polyphenol cao. 4992709/4992710 Hệ thống nhà máy DNAquick áp dụng phương pháp dựa trên chất lỏng. Chiết xuất phenol / chloroform cũng không cần thiết. Quy trình tinh chế đơn giản và nhanh chóng, không giới hạn lượng mẫu ban đầu, do đó người dùng có thể điều chỉnh lượng linh hoạt theo yêu cầu thí nghiệm. Kích thước lớn của các đoạn gDNA có thể thu được với năng suất cao.

DNA bộ gen được trích xuất từ ​​các thể tích khác nhau của các mẫu máu toàn phần của con người bằng Bộ công cụ DNA máu TIANamp. Kết quả như sau. Các kết quả chỉ được liệt kê dưới dạng tham khảo, kết quả chiết xuất thực tế phụ thuộc vào điều kiện của mẫu.

Việc tách chiết DNA cục máu đông có thể được thực hiện bằng cách sử dụng thuốc thử được cung cấp trong hai bộ dụng cụ này bằng cách chỉ cần thay đổi quy trình thành hướng dẫn cụ thể cho việc tách chiết DNA cục máu đông. Bản mềm của quy trình tách chiết DNA cục máu đông có thể được cấp khi có yêu cầu.

Đình chỉ mẫu mới với 1 ml PBS, dung dịch muối thông thường hoặc đệm TE. Đồng nhất hoàn toàn mẫu bằng thiết bị đồng nhất và thu kết tủa xuống đáy ống bằng cách ly tâm. Vứt bỏ phần nổi phía trên và lắng lại kết tủa bằng 200 μl đệm GA. Việc tinh sạch DNA sau đây có thể được thực hiện theo hướng dẫn.

Để tinh sạch gDNA trong các mẫu huyết tương, huyết thanh và dịch cơ thể, TIANamp Micro DNA Kit được khuyên dùng. Để tinh sạch gDNA của vi rút từ các mẫu huyết thanh / huyết tương, TIANamp Virus DNA / RNA Kit được khuyến nghị. Để tinh sạch gDNA của vi khuẩn từ các mẫu huyết thanh và huyết tương, TIANamp Bacteria DNA Kit được khuyến nghị (nên bao gồm lysozyme đối với vi khuẩn dương tính). Đối với các mẫu nước bọt, nên sử dụng Hi-Swab DNA Kit và TIANamp Bacteria DNA Kit.

DNAsecure Plant Kit hoặc DNAquick Plant System được khuyến khích sử dụng để chiết xuất bộ gen của nấm. Đối với chiết xuất bộ gen nấm men, nên sử dụng TIANamp Yeast DNA Kit (nên tự chuẩn bị lyticase).